● 稀釋針頭和稀釋液瓶過(guò)酒精燈火焰消毒，稀釋針頭插到稀釋液瓶
里，開(kāi)機(jī)，將稀釋液倒置，把稀釋液注入樣品瓶中，樣品瓶中稀釋液加滿(mǎn)后，放下稀釋液瓶，再倒置樣品瓶，使溶解后的供試品通過(guò)培養(yǎng)期進(jìn)行集菌，（重復(fù)操作每個(gè)樣品的過(guò)濾程序）
● 完成集菌后，對(duì)培養(yǎng)器里的抑菌成份進(jìn)行沖洗，加沖洗液前，先將濾帽取下，再加入沖洗液（加至美杯體100ml），并同時(shí)振蕩一次性培養(yǎng)器，使抑菌成份充分沖洗掉。蓋上濾帽，將沖洗液濾出。
● 根據(jù)每種樣品的抑菌成份的濃度，用戶(hù)按照2005版《中國(guó)藥典》驗(yàn)證方法來(lái)確定沖洗量。
● 沖洗完畢后，開(kāi)啟已滅菌好的培養(yǎng)基瓶，將針頭插入培養(yǎng)基瓶中。
摘下一次性培養(yǎng)其頂部濾器開(kāi)口的膠塞，套在一次性培養(yǎng)器的底口上，用軟管夾子依次開(kāi)閉軟管，開(kāi)啟集菌儀，將培養(yǎng)基注入到培養(yǎng)器內(nèi)。（先取兩個(gè)夾子夾住彈性軟管定位處的兩根管子，先加入改良馬丁培養(yǎng)基；再取另外一個(gè)夾子夾住另外一根管子，并拔去先前的兩個(gè)夾子，加入硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基）。
● 子夾閉與一次性培養(yǎng)器連接部的軟管，留出5-6cm軟管，剪除其余部分，并將開(kāi)口端插在空氣濾器的開(kāi)口上。
● 按照藥典規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)行培養(yǎng)。
● 情況，若需取樣分離培養(yǎng)，可將軟管消毒，用無(wú)菌注射器插入軟管抽取所需量做進(jìn)一步檢查。
純凈水、注射用水、上清水、口服液等的薄膜過(guò)濾方法
1、取濾膜（直徑50mm）N張浸泡在純化水里約5分鐘
2、用鑷子取出濾膜平貼在不銹鋼網(wǎng)片上，將不銹鋼網(wǎng)片放入不銹剛底轉(zhuǎn)速：0-240轉(zhuǎn)/分座里，放入墊片和O型圈，將螺蓋和杯體蓋緊組裝成一套完整的全封閉過(guò)濾培養(yǎng)器。
3、滅菌，用牛皮紙將組裝好的培養(yǎng)器包好，放入高壓濕熱滅菌鍋里進(jìn)行滅菌（按照2005年中國(guó)藥典）的規(guī)定進(jìn)行滅菌。
4、取滅菌好的培養(yǎng)器至為微生物限度檢定室，進(jìn)行集菌過(guò)濾。
5、打開(kāi)配置好的固體培養(yǎng)基，將集菌好的濾膜平貼在培養(yǎng)基上（濾膜上不可以有氣泡產(chǎn)生）。
6、按照中國(guó)藥典的規(guī)定進(jìn)行培養(yǎng)。
注意：
1.液層高度的控制方法：取下濾器頂部膠帽，向?yàn)V器內(nèi)泵入沖洗液，沖洗液至適宜高度時(shí)，套上膠帽
2.沖洗時(shí)，若出現(xiàn)濾膜上無(wú)液層覆蓋現(xiàn)象，說(shuō)明濾器內(nèi)氣壓過(guò)高，取下膠帽放氣，然后套上。
3.應(yīng)保持雙芯針頭空氣過(guò)濾內(nèi)的濾膜的干燥，可確保其留意暢通。
4.根據(jù)樣品性狀，控制集菌儀適宜轉(zhuǎn)速，以進(jìn)液管不出現(xiàn)氣泡為宜。若進(jìn)液管出現(xiàn)氣泡，將低轉(zhuǎn)速既可避免，否則應(yīng)檢查針頭是否被堵塞。
5.為便于操作，推薦選用帶膠塞的500ml玻璃吸濕器。
6.未盡事宜請(qǐng)參考《中國(guó)藥典》附錄“無(wú)菌檢查法和微生物限度檢查發(fā)”章節(jié)
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